以下是ELISA測定中定性與定量分析的對比說明:
一、核心區(qū)別?
維度? ?定性分析? ?定量分析?
檢測目標(biāo)? 判斷樣本中目標(biāo)物是否存在(陽性/陰性) 精確測定目標(biāo)物濃度(ng/mL或IU/mL)
數(shù)據(jù)輸出? 通過OD值與臨界值(Cut-off)比較判斷結(jié)果 通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度值
適用方法? 競爭法、直接法為主 雙抗夾心法為主(靈敏度更高)
二、定性分析關(guān)鍵點(diǎn)?
結(jié)果判讀?
肉眼觀察顏色變化或通過酶標(biāo)儀讀取OD值,與預(yù)設(shè)閾值比較
例如:HIV抗體篩查中OD值>Cut-off判為陽性
臨界值設(shè)定?
通常為陰性對照OD值的2.1倍(需結(jié)合試劑盒說明調(diào)整)
三、定量分析技術(shù)要點(diǎn)?
標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建?
使用5-7個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品(如0-1000 pg/mL)
推薦4/5參數(shù)邏輯(4PL/5PL)曲線擬合(R2>0.99)
濃度計(jì)算?
將樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,乘以稀釋倍數(shù)
示例:人IL-6檢測中,OD=1.2對應(yīng)曲線濃度250 pg/mL
四、方法選擇建議?
優(yōu)先定性?:快速篩查(如妊娠試紙、傳染病初篩)
優(yōu)先定量?:科研數(shù)據(jù)(如細(xì)胞因子表達(dá)量)、臨床療效監(jiān)測
注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。
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